Vortexing ne bo strigel vaše RNA, da bi postal neuporaben, če izvajate naključno pripravo RT - samo če želite klonirati dolgo mRNA. Tudi tehnična podpora Invitrogena je pravilna. Kloroform je težji od Trizola in bo potonil na dno epruvete.
Ali je varno vrtinčiti RNA?
Ne vrtinčite Trizol lizatov ali vzorcev RNA, da preprečite striženje. Po ekstrakciji hranite vzorce RNA ves čas na ledu. Ta protokol je zasnovan za vzorce, lizirane po 1 ml Trizola v 1,5 ali 2 ml epruveti.
Ali lahko segrejete RNA?
Zato se izogibajte visokim temperaturam ( nad +65°C), ker te vplivajo na celovitost RNA. Namesto tega, da stopite sekundarne strukture, segrevajte RNA na +65°C 15 minut v prisotnosti denaturacijskih pufrov.
Kako resuspendirate RNA pelete?
resuspendirajte vaš pelet s toplo vodo (40-50 stopinj Celzija). inkubiramo pri 45 stopinjah celc 10 minut. postavite jih v +4 za 4-6 ur.
Kako oboriš RNA?
A.
Po prilagoditvi koncentracije soli se lahko RNA obori z dodajanjem 2,5 volumna etanola ali 1 volumna izopropanola in temeljito premešanje, sledi hlajenje vsaj 15 minut pri -20° C.