A enojno centrifugiranje z nizko g-silo korak omogoča blago lizo celic in preprečuje obsežen stik jeder s citoplazmatskim okoljem. Ta hitra metoda kaže visoko obnovljivost zaradi relativno majhne manipulacije celic, ki jo zahteva raziskovalec.
Kaj centrifugiranje naredi celicam?
Centrifugiranje pri različnih hitrostih omogoča ločitev delcev na 'frakcije', glede na to, kako hitro se usedajo (okvir 1). Na primer, pri nizkih hitrostih centrifugiranja je mogoče velike celice ločiti od majhnih.
Ali centrifugiranje odstrani odmrle celice?
Ločitev mrtvih in živih celic s centrifugiranjem
Ena najpreprostejših metod odstranjevanja celičnih ostankov je centrifugiranje z gradientom gostote. Centrifugiranje z gradientom gostote uporablja napravo, imenovano centrifuga, ki vrti heterogeno mešanico pri visokih hitrostih.
Kako lizirate celice?
Tehnika vključuje zamrzovanje celične suspenzije v suhi kopeli ledu/etanola ali zamrzovalniku in nato odtajanje materiala pri sobni temperaturi ali 37°C. Ta metoda lize povzroči, da celice nabreknejo in se na koncu zlomijo, ko se med zamrzovanjem oblikujejo ledeni kristali in se nato med odmrzovanjem skrčijo.
Kaj se zgodi, če celice centrifugirate prehitro?
Prehitro vrtenje lahko povzroči "razmaz" celic na steni epruvete, ki vam morda manjka pri resuspendiranju celic.
