Nitrocelulozne membrane so priljubljena matrica, ki se uporablja pri blotingu beljakovin zaradi njihove visoke afinitete vezave na beljakovine, združljivosti z različnimi metodami detekcije (kemiluminiscenca, kromogena in fluorescenca), in sposobnost imobilizacije beljakovin, glikoproteinov ali nukleinskih kislin.
Zakaj uporabljamo nitrocelulozo?
Nitrocelulozno stekelce, nitrocelulozna membrana ali nitrocelulozni papir je lepljiva membrana, ki se uporablja za imobilizacijo nukleinskih kislin v južnih in severnih blotih Uporablja se tudi za imobilizacijo beljakovin v zahodnih blots in mikroskopija z atomsko silo za njeno nespecifično afiniteto za aminokisline.
Zakaj se PVDF uporablja pri Western blottingu?
Western blotting z uporabo membran iz poliviniliden difluorida (PVDF) je ena izmed najbolj priljubljenih tehnik za odkrivanje in karakterizacijo beljakovin. Če je ta tehnika kombinirana z imunodetekcijo, je mogoče razjasniti obnašanje določene beljakovine.
Ali je nitrocelulozna membrana hidrofobna?
Za razliko od poliakrilamida nitroceluloza zagotavlja ustrezno podporo za kasnejše obarvanje beljakovin ali imunokemično karakterizacijo. Vezava na nitrocelulozo je pretežno posredovana s hidrofobno interakcijo (Schneider, 1980), čeprav so lahko vključene tudi elektrostatične sile (Farrah et al., 1981.
Kaj je bolje nitroceluloza ali PVDF?
Medtem ko je nitroceluloza krhka in krhka, je PVDF bolj trpežna in ima večjo kemično odpornost, zaradi česar je idealna za ponovno sondiranje in zaporedje aplikacij. Nitrocelulozo je težko odstraniti in ponovno sondirati brez izgube signala.
