Difenilaminska metoda Druga metoda za kvantificiranje DNK, ki temelji na absorpciji, uporablja difenilamin. Difenilamin reagira z deoksiriboznimi sladkorji v kislih pogojih in tvori modri kompleks, ki ga je mogoče kvantificirati pri 595 nm.
Kateri reagent se uporablja za kvantificiranje DNK?
Fluorescenčna detekcija z Hoechst 33258 reagent je občutljiva in natančna metoda za kvantifikacijo DNK, če je vsebnost G+C manjša od 50%. Poleg tega ta metoda omogoča kvantificiranje zelo nizkih ravni DNK (nanogramska lestvica).
Kaj je kvantificiranje DNK?
kvantifikacija DNK in kvantifikacija RNA, splošno znana kot kvantifikacija nukleinske kisline, se običajno izvaja za določitev povprečne koncentracije DNK ali RNA v vzorcu pred nadaljevanjem poskusov na nižji stopnji.
Katera metoda se uporablja za oceno DNK?
Za oceno količine DNK v dani neznani raztopini z difenilaminsko metodo PRINCIP: Ko DNK obdelamo z difenilaminom v kislem stanju, nastane modrikasto zeleno obarvan kompleks, ki ima absorpcijski vrh pri 595 nm. To reakcijo dajeta 2 deoksipentoza na splošno.
Katera je najboljša metoda za kvantificiranje DNK?
Izbira najboljše metode kvantifikacije DNK
- verižna reakcija polimeraze v realnem času. PCR v realnem času, včasih imenovan qPCR, je zaradi svoje občutljivosti, specifičnosti in dinamičnega razpona ena najpogostejših metod kvantifikacije RNA in DNK, ki se danes uporablja. …
- UV-Vis spektrofotometrija. …
- Fluorescenca.
